皮膚性病學/實驗室檢查

皮膚組織病理檢查

當臨床診斷有困難時，組織病理檢查常有助於診斷和分型。

皮損的選擇

• 通常選擇成熟而未經治療的典型損害，同時帶一部分損害周圍的正常皮膚，以便與病變組織作對比。

• 水疱、膿疱或需尋找病原體的損害，應切取早期損害，水疱或膿疱應完整切取。

• 如系較大的損害，應取其活動性的邊緣。如同時存在幾種皮膚病的損害時，應分別取其皮損做檢查。

取材方法

有外科手術法及鑽孔法兩種。

外科手術法

　常規消毒皮膚和局部麻醉後，按無菌操作法，用手術刀沿皮紋方向做長1cm、寬0.3～0.5cm的梭形切口，刀鋒沿皮面垂直，切取標本應深達皮下組織，底部與表面寬度一致。切忌用鉗夾取組織，以免造成人為的組織變化，切取的標本應平放在吸水紙上，以防標本捲曲，或立即放入盛有10%甲醛液或95%乙醇的小瓶中固定。待送病理檢查。

鑽孔法

　用於皮損較小無須刀切或刀切困難者。消毒局麻後，以左手固定並繃緊局部皮膚，右手持皮膚組織鑽孔器鑽孔，達到一定深度後，用有齒鑷小心提起組織，取小彎剪從其根部剪下，即可固定送檢。壓迫創口止血，塗布少許碘仿，加壓包紮。顏面部用此法時，應縫合創口。

真菌檢查

真菌檢查對皮膚真菌病的診斷具有重要意義。常用的有直接鏡檢和真菌培養。

標本的採集

　淺部真菌病常採取鱗屑、菌痂、毛髮和甲屑等標本。取材時應選擇未治療和病灶邊緣的新損害。病甲應先刮除甲板表層及游離緣的病變組織，然後取其深層的甲屑。深部真菌病，根據病情採取膿液、痰、尿、糞、口腔、陰道分泌物以及各種穿刺液和病變組織等，應以無菌操作方法採取標本。

直接鏡檢

　將採取的標本置於載玻片上，通常滴上1～2滴10%～20%氫氧化鉀溶液以溶解角質，蓋上蓋玻片，放置數分鐘或在火焰上微加溫以加速角質溶解，然後輕輕壓緊蓋玻片，驅除空氣泡，吸去周圍溢液，以免沾污蓋玻片而妨礙鏡檢。有些標本（如腦脊液檢查隱球菌）需滴1滴印度墨水使之混勻後加蓋玻片後鏡檢。某些深部真菌病須用革蘭、瑞特或姬姆薩等染色後鏡檢。如一次檢查為陰性，應重複檢查，必要時做真菌培養。

真菌培養

　主要用於確定菌種，也可用作輔助直接鏡檢的檢查結果。常用的培養方法有常規培養、大培養和微量培養3種。常規培養一般用試管培養，在無菌條件下將標本接種於沙煲培養基斜面上。一般每一斜面接種2～3處，每份病材接種2～3管。淺部真菌，在25℃室溫下培養，一般1周左右即開始生長，觀察2～3周；深部真菌，在37℃下培養，觀察3～4周。

濾過紫外線檢查

濾過紫外線檢查（Wood燈檢查）即通過含氧化鎳的石英玻璃過濾後所獲得的長波紫外線，照射某些皮膚病的皮損或其他排泄物。根據其是否出現熒光或出現何種顏色的熒光，對某些皮膚病的診斷和鑑別診斷提供依據。如白癬的病發呈亮綠色熒光，黃癬呈暗綠色熒光，黑點癬無熒光，紅癬呈珊瑚紅色熒光，鱗癬呈亮紅色熒光，基底細胞癌則無熒光。

疥蟎檢查

針挑法

　首先用藍墨水滴於皮損處尋找隧道。選用6號注射針頭，在隧道末端蟲點處，距離蟲點底部1mm，垂直於隧道長軸進針，直至蟲點底部，並繞過蟲體，然後放平針杆（5°～10°），稍加轉動，疥蟲即落入針口孔槽內，緩慢挑破皮膚出針，蟲點多在水疱的邊緣。

刮片法

　主要對丘疹內疥蟎進行檢查，用消毒外科刀片蘸少許礦物油尋找新發的炎性丘疹，平刮以刮取丘疹頂部的角質部分，至油滴內有細小血點為止。連刮6～7個丘疹後，移至載玻片上，鏡下可見幼蟲、蟲卵及蟲糞。

細胞學診斷

適用於疱疹性、病毒性皮膚病和基底細胞癌皮損。在顯微鏡下，這些損害的細胞塗片檢查，可較快地獲得比較正確的診斷。方法簡單，較易掌握。外周血檢測紅斑狼瘡細胞或Sézary細胞，對明確診斷也有幫助。

梅毒螺旋體檢查

梅毒螺旋體暗視野顯微鏡檢查

　檢查者戴手套，無菌生理鹽水棉拭子拭去皮損（硬下疳、潰瘍、扁平濕疣及濕丘疹等）表面污物，或用消毒鈍刀輕輕除去痂皮，輕刮皮損表面並輕施壓力至出現滲液而無出血為度。用蓋玻片蘸取少量滲出液，覆蓋於有生理鹽水的載玻片上，蓋上蓋玻片，置於暗視野顯微鏡下，見長5～20μm、有6～12個螺旋、運動活潑的螺旋體即為陽性。

螺旋體鍍銀染色法

　螺旋體具有親銀性，硝酸銀可使之染呈棕黑色。方法：取材、塗片，空氣中自然乾燥，用羅氏固定液固定1～2min，無水乙醇洗滌。滴媒染液2～3滴，酒精燈微加熱至產生熱蒸汽為止，染30s，水洗，最後滴加銀染液，並加熱產生蒸汽，染30s，水洗，自然乾燥，置油鏡下檢查。陽性結果為淡棕色背景下，見染成棕黑色的螺旋體。

螺旋體免疫熒光染色法

直接法

將受檢標本均勻塗佈於載玻片上，自然乾燥後用丙酮固定10min。另外，用可培養的非致病性螺旋體培養物進行吸收的抗人（兔）梅毒螺旋體血清與FITC結合，並以適當稀釋的此血清塗於備有標本的載玻片上，37℃孵育30min。徹底清洗，緩衝甘油封固，熒光顯微鏡鏡檢。

間接法

標本製作及固定同直接法。加經吸收的抗血清，37℃孵育30min，徹底沖洗；加FITC結合的抗人（兔）Ig，孵育30min，徹底沖洗；緩衝甘油封固，待檢。發現呈亮綠色熒光的梅毒螺旋體為陽性，可確診梅毒。

淋球菌檢查

直接塗片檢查

　取膿性分泌物塗片、乾燥、固定、革蘭染色，可見革蘭陰性細胞內雙球菌。女性患者須取宮頸分泌物做培養。

培養

　取男性尿道口以上2.0～4.0cm及女性宮頸2.0～4.0cm處分泌物，直接接種於T-M、NYG培養基培養，24～48h挑取菌落做革蘭染色、氧化酶試驗及糖發酵試驗等鑑定，並做藥敏試驗測最小抑菌濃度以及β－內醯胺酶檢測。