皮肤性病学/实验室检查

皮肤组织病理检查

当临床诊断有困难时，组织病理检查常有助于诊断和分型。

皮损的选择

• 通常选择成熟而未经治疗的典型损害，同时带一部分损害周围的正常皮肤，以便与病变组织作对比。

• 水疱、脓疱或需寻找病原体的损害，应切取早期损害，水疱或脓疱应完整切取。

• 如系较大的损害，应取其活动性的边缘。如同时存在几种皮肤病的损害时，应分别取其皮损做检查。

取材方法

有外科手术法及钻孔法两种。

外科手术法

　常规消毒皮肤和局部麻醉后，按无菌操作法，用手术刀沿皮纹方向做长1cm、宽0.3～0.5cm的梭形切口，刀锋沿皮面垂直，切取标本应深达皮下组织，底部与表面宽度一致。切忌用钳夹取组织，以免造成人为的组织变化，切取的标本应平放在吸水纸上，以防标本卷曲，或立即放入盛有10%甲醛液或95%乙醇的小瓶中固定。待送病理检查。

钻孔法

　用于皮损较小无须刀切或刀切困难者。消毒局麻后，以左手固定并绷紧局部皮肤，右手持皮肤组织钻孔器钻孔，达到一定深度后，用有齿镊小心提起组织，取小弯剪从其根部剪下，即可固定送检。压迫创口止血，涂布少许碘仿，加压包扎。颜面部用此法时，应缝合创口。

真菌检查

真菌检查对皮肤真菌病的诊断具有重要意义。常用的有直接镜检和真菌培养。

标本的采集

　浅部真菌病常采取鳞屑、菌痂、毛发和甲屑等标本。取材时应选择未治疗和病灶边缘的新损害。病甲应先刮除甲板表层及游离缘的病变组织，然后取其深层的甲屑。深部真菌病，根据病情采取脓液、痰、尿、粪、口腔、阴道分泌物以及各种穿刺液和病变组织等，应以无菌操作方法采取标本。

直接镜检

　将采取的标本置于载玻片上，通常滴上1～2滴10%～20%氢氧化钾溶液以溶解角质，盖上盖玻片，放置数分钟或在火焰上微加温以加速角质溶解，然后轻轻压紧盖玻片，驱除空气泡，吸去周围溢液，以免沾污盖玻片而妨碍镜检。有些标本（如脑脊液检查隐球菌）需滴1滴印度墨水使之混匀后加盖玻片后镜检。某些深部真菌病须用革兰、瑞特或姬姆萨等染色后镜检。如一次检查为阴性，应重复检查，必要时做真菌培养。

真菌培养

　主要用于确定菌种，也可用作辅助直接镜检的检查结果。常用的培养方法有常规培养、大培养和微量培养3种。常规培养一般用试管培养，在无菌条件下将标本接种于沙煲培养基斜面上。一般每一斜面接种2～3处，每份病材接种2～3管。浅部真菌，在25℃室温下培养，一般1周左右即开始生长，观察2～3周；深部真菌，在37℃下培养，观察3～4周。

滤过紫外线检查

滤过紫外线检查（Wood灯检查）即通过含氧化镍的石英玻璃过滤后所获得的长波紫外线，照射某些皮肤病的皮损或其他排泄物。根据其是否出现荧光或出现何种颜色的荧光，对某些皮肤病的诊断和鉴别诊断提供依据。如白癣的病发呈亮绿色荧光，黄癣呈暗绿色荧光，黑点癣无荧光，红癣呈珊瑚红色荧光，鳞癣呈亮红色荧光，基底细胞癌则无荧光。

疥螨检查

针挑法

　首先用蓝墨水滴于皮损处寻找隧道。选用6号注射针头，在隧道末端虫点处，距离虫点底部1mm，垂直于隧道长轴进针，直至虫点底部，并绕过虫体，然后放平针杆（5°～10°），稍加转动，疥虫即落入针口孔槽内，缓慢挑破皮肤出针，虫点多在水疱的边缘。

刮片法

　主要对丘疹内疥螨进行检查，用消毒外科刀片蘸少许矿物油寻找新发的炎性丘疹，平刮以刮取丘疹顶部的角质部分，至油滴内有细小血点为止。连刮6～7个丘疹后，移至载玻片上，镜下可见幼虫、虫卵及虫粪。

细胞学诊断

适用于疱疹性、病毒性皮肤病和基底细胞癌皮损。在显微镜下，这些损害的细胞涂片检查，可较快地获得比较正确的诊断。方法简单，较易掌握。外周血检测红斑狼疮细胞或Sézary细胞，对明确诊断也有帮助。

梅毒螺旋体检查

梅毒螺旋体暗视野显微镜检查

　检查者戴手套，无菌生理盐水棉拭子拭去皮损（硬下疳、溃疡、扁平湿疣及湿丘疹等）表面污物，或用消毒钝刀轻轻除去痂皮，轻刮皮损表面并轻施压力至出现渗液而无出血为度。用盖玻片蘸取少量渗出液，覆盖于有生理盐水的载玻片上，盖上盖玻片，置于暗视野显微镜下，见长5～20μm、有6～12个螺旋、运动活泼的螺旋体即为阳性。

螺旋体镀银染色法

　螺旋体具有亲银性，硝酸银可使之染呈棕黑色。方法：取材、涂片，空气中自然干燥，用罗氏固定液固定1～2min，无水乙醇洗涤。滴媒染液2～3滴，酒精灯微加热至产生热蒸汽为止，染30s，水洗，最后滴加银染液，并加热产生蒸汽，染30s，水洗，自然干燥，置油镜下检查。阳性结果为淡棕色背景下，见染成棕黑色的螺旋体。

螺旋体免疫荧光染色法

直接法

将受检标本均匀涂布于载玻片上，自然干燥后用丙酮固定10min。另外，用可培养的非致病性螺旋体培养物进行吸收的抗人（兔）梅毒螺旋体血清与FITC结合，并以适当稀释的此血清涂于备有标本的载玻片上，37℃孵育30min。彻底清洗，缓冲甘油封固，荧光显微镜镜检。

间接法

标本制作及固定同直接法。加经吸收的抗血清，37℃孵育30min，彻底冲洗；加FITC结合的抗人（兔）Ig，孵育30min，彻底冲洗；缓冲甘油封固，待检。发现呈亮绿色荧光的梅毒螺旋体为阳性，可确诊梅毒。

淋球菌检查

直接涂片检查

　取脓性分泌物涂片、干燥、固定、革兰染色，可见革兰阴性细胞内双球菌。女性患者须取宫颈分泌物做培养。

培养

　取男性尿道口以上2.0～4.0cm及女性宫颈2.0～4.0cm处分泌物，直接接种于T-M、NYG培养基培养，24～48h挑取菌落做革兰染色、氧化酶试验及糖发酵试验等鉴定，并做药敏试验测最小抑菌浓度以及β－内酰胺酶检测。